Protease inhibitor?

 protease 혹은 phosphatase의 기능을 억제하는 "inhibitor"들입니다.

 

RIPA를 사용하여 cell을 깰 때,

 

우리가 원하는 단백질이 분해되어 버리거나,

 

dephospholylation되는 것을 막기 위해 첨가하죠.

 

일반적으론 protease inhibitor만 넣기도 하는데,

 

특별한 실험 목적, 즉 단백질의 phosphorylation과 관련된 실험을 할 경우라면,

 

당연히 phosphatase inhibitor를 첨가해야 하겠죠?

 

이런 inhibitor들은 워낙 열에 약하기 때문에 RIPA 10X stock에는 첨가 하여 보관하지 않고

 

사용 직전에 RIPA를 1X로 희석해서 쓸 때 첨가하게 됩니다.

 

매우 다양한 protease inhibitor와 phosphatase inhibitor가 존재하므로,

 

여기선 질문하신 inhibitor들만 답해드리겠습니다.

 

 

Protease Inhibitors

 

PMSF (Phenylmethylsulfonyl fluoride)

Serine/Cystein protease inhibitors; trypsin, chymotrypsin, papain(cysteine protease), 그리고 mammalian acetylcholinesterase 등의 기능을 억제.

 

Aprotinin

Serine protease inhibitor; 단, Thrombin 및 factor Xa는 억제하지 못함.

 

Leupeptin

Serine/Cystein protease inhibitors; plasmin, trypsin, papain, cathepsin B등을 억제

 

 

Phosphatase Inhibitors

 

Na3VO4 (Sodium orthovanadate) ..."Na3O4U"는 잘못 쓰신거겠죠?

ATPase, alkaline phosphatase, 그리고 tyrosine phosphatase를 억제

NaF (Sodium Fluoride)

Serine/Threonine phosphatase의 inhibiotors

 

 

Sigma Chemical (www.sial.com)등에선 이런 protease inhibitor와

 

phosphatase inhibitor들을 미리 섞어놓은 다양한 종류의 cocktail을 판매하고 있답니다.